乳化剂对阿司匹林微球制备的影响
冼远芳，侯瑞珍 （长春工业大学化工学院，吉林长春１３００１２）
[摘要] 目的：用溶剂挥发法以聚乳酸为载体制得阿司匹林聚乳酸微球。方法：选择不同的乳化剂，用正交设计安排实验。并以微球包埋率、载药量、表面形态、体外释放为指标优化微球的制备工艺。结果：按优化条件制得的微球包埋率３９．５％，载药量７．２５％，体外释药狋１／２为３犱。结论：制备微球缓释效果明显。
[关键词] 阿司匹林；聚乳酸；乳化挥发法；正交实验；缓释微球
[中图分类号] ９２５ [文献标识码] A [文章编号]１００１５２１３（２００７）０３０３２４０４
多项研究证明阿司匹林（犃犛犃）除了镇痛、解热外，还具有许多作用（如抗癌、预防死胎等），尤其是防治冠心病及中风的作用已为临床所肯定，成为防治血栓性疾病的常用新药。但阿司匹林会直接损伤胃黏膜可引起胃出血。更重要的是阿司匹林抑制了血栓素２的合成，降低了血小板的聚集能力，使出血不容易停止。若制成缓释制剂，血药质量浓度便可保持稳定，还可避免对胃刺激，适用于长期服用阿司匹林的患者。
本实验选择可降解的高分子材料聚乳酸（犘犞犃）为载体，用溶剂挥发法制备阿司匹林聚乳酸微球，并对其药物包埋率、收率、含药量、缓释性能及外形进行了研究。
１ 材料
K Q３２００型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；犔犌犚１０－４．２北京医用离心机（北京仪器有限公司）；T H Z－８２气浴恒温振荡器（江苏金坛市金城国胜实验仪器厂）；U V７５４N紫外可见分光光度计（上海精密仪器有限公司）；T X５１倒置显微镜（日本）；透析袋（美国）；阿司匹林微球（自制）；聚乳酸（美国，分子质量６．２万）；甲基纤维素（上海化学试剂公司）；西黄蓍胶（上海中国医药集团）；阿拉伯胶（上海国药集团化学试剂）。
２ 方法
２．１ O／W制备阿司匹林P L A微球 适量聚乳酸溶解在二氯甲烷中，精密称取阿司匹林药物加到上述溶液中，超声分散后在不断搅拌下滴加到甲基纤维素溶液（或西黄蓍胶溶液或阿拉伯胶溶液）中，室温不断搅拌１５～１７犺待二氯甲烷挥发净。静止沉淀，去除上层液体，用纯化水洗涤４～５次，在３７℃去湿干燥。精密称量，计算收率：收率％＝产量／投入量。
２．２ 正交设计安排实验 利用正交设计的数学方法进行实验设计。根据单因数考察结果，选择对微球制备工艺影响较显著的４个因数作为考察对象，即聚乳酸用量（A），药品用量（B），外水相的浓度（E），二氯甲烷用量（D），每个因素采取三个水平，列因素水平表１。
２．３ 微球包埋率、药物含量及形态的测定
２．３．１ 阿司匹林标准曲线的测定 精密称取阿司匹林２５mg，置于５０ml量瓶中，P H７．４的磷酸缓冲溶液溶解并定容，分别取该液２．０，４．０，６．０，８．０，１０，１５，２０，２５ml，各加５ml０．１mol·L－１的氢氧化钠溶液，超声振荡５min后加１０ml０．２５mol１·L－１的硫酸溶液，置于５０ml量瓶中定容。然后在３０３nm波长处测定其吸收度（A）。C为溶液质量浓度（g·L－１）。线性回归得到标准曲线程：A＝０．０２０１４＋０．０１８６１C（r＝０．９９９５４）。
２．３．２ 包埋率的测定
准确称取约１０mg制备的微球于离心管中，加适量无水乙醇（５ml），用超声波将微球破坏，离心（５０００r·min－１）５min。取２．５ml清液在恒温振荡器中挥发掉乙醇后，加０．５ml０．１mol·L－１的氢氧化钠溶液，超声分散５～１０min，加1ml０．２５mol·L－１硫酸溶液及１０ml纯化水，在３０３nm的波长测定，根据标准曲线方程计算包埋率。
包封率（包埋率）％＝微球中药物含量／投药量
载药量（药物包裹率）％＝实际投药量／微球实际重量
２．３．３ 微球形态的表征
２．３．４ 体外药物的释放
依据中国药典２００５年版释放度测定法，选定释放介质为PH７．４的磷酸缓冲溶液，温度保持在３７℃，振荡速度为１００r·min－１。将一定量的阿司匹林／PLGA微球用缓冲溶液１．５ml冲洗入透析袋中，两端扎紧，置于５０ml磷酸缓冲溶液中，在不同时间点取样５ml，同时补充)５ml缓冲溶液，紫外法测定其浓度，根据标准曲线方程算得累积释放度。
累积释药百分率＝总释放量／含药量
３ 结果
３．１ 正交优化实验结果比较
以甲基纤维素溶液为外水相的正交实验结果列表２，分析比较极差R，确定主次因素顺序为A＞C＞D＞B。其中，A因素：K３＞K２＞K１；B因素：K２＞K１＞K３；C因素：K３＞K１＞K２；D因素：K２＞K１＞K３；因此，A３C３D２B２为最优处方。即聚乳酸０．３０g，二氯甲烷８ml，阿司匹林０．０７g，甲基纤维素溶液０．１％。
同理，以西黄蓍胶溶液为外水相的正交实验结果分析比较，最优处方为聚乳酸０．２０g，二氯甲烷８ml，阿司匹林０．０５g，西黄蓍胶溶液０．３％。
以阿拉伯胶溶液为外水相的正交实验结果分析比较，最优处方为聚乳酸０．２０g，二氯甲烷５ml，阿司匹林０．０５g，阿拉伯胶溶液０．７％。
３．２ ３种外水相制备微球的比较
选择对微球制备工艺影响较显著的４个因数作为考察对象，即载药的用量（A），药品的用量（B），外水相质量分数（C），二氯甲烷的用量（D），每个因素采取３个水平，水平１为甲基纤维素溶液，水平２为西黄蓍胶溶液，水平３为阿拉伯胶溶液。因素水平表如表３。按上述正交实验，结果分析，最优处方为聚乳酸０．２０g，二氯甲烷８ml，阿司匹林０．０５g，甲基纤维素溶液０．１％。以此最佳处方制备微球的包埋率为３９．５％；载药量为７．２５％，收率为３６．５６％。
３．３ 缓释突释现象分析
药物完全释放需要２６７h（约１１d）。甲基纤维素为外水相制备的微球释放曲线最平缓，说明缓释效果优于其他两种。
释药达到一半所需时间比较，外水相甲基纤维素制备的微球需７０h（约３d），西黄蓍胶为外水相的需１d，阿拉伯胶需２d，则甲基纤维素为外水相的突释现象缓和些。
３．４ 电镜分析 用显微镜观察其形态。从微球的光滑、规整、互相黏连情况等外观看，以甲基纤维素为外水相制备的微球的电镜图好于另两种。微球外观情况：甲基纤维素﹥西黄蓍胶﹥阿拉伯胶。
４ 讨论综合各因素，阿司匹林聚乳酸微球最优处方为聚乳酸０．２０g，二氯甲烷８ml，阿司匹林０．０５g，甲基纤维素溶液０．１％。其包埋率３９．５％，收率３６．５６％，载药量７．２５％。药物全部释放时间约１１
d，释药５０％需７０h，则此种方法制备的微球有较好的形态及缓释、突释性能。
参考文献：
［１］ 张蜀，潭载友，陈济民．聚乳酸类缓释，控释注射剂的研究进展［J］．中国药学杂志，２００２，３７（１１）：８１０８１２．
［２］ 鞠秀兰．PLGA控释微球注射剂的研究进展［J］．卫生职业教育，２００５．２３（１１）．１２３１２４．
［３］ 雷永，陆彬．可生物降解的犘犈犔犃微球优化工艺的研究［J］．华西药学杂志，１９９４，９（４）：２１５２１７．
［４］ 杜兵，程祥荣．聚乳酸及其共聚物微球的性质及应用［J］．国外医学生物医学工程分册，２００２，５（２５）；２３８２４１．
［５］ 任杰，宋金星，洪海燕．生物可降解PLA---PEG共聚物微球的制备及表征［J］．同济大学学报，２００３，３１（２）；１９１１９５．［６］ 赵锋，高永良．乳化分散法制备聚乳酸微球的研究进展［J］．中国新药杂志，２００２，２（１１）：１２３１２６．
［７］ 赵瑞玲，丁红，谢茵．阿霉素聚乳酸微球的制备及体外释药特性研究［J］．中国医院药学杂志，２００４，２（２４）：７４７５．
［８］ 李良，李国明．W／O法制备盐酸土霉素／聚乳酸微球及其释药性能［J］．中国现代应用药学杂志，２００５，１（２２）：４９５２．
［９］ 霍东杰，邓树海．顺铂聚乳酸微球的制备及体外释药［J］．中国医药工业杂志，２００３，３４（２）：８１８３．
［１０］雄素彬，陆彬．氟尿嘧啶微球的制备工艺［J］．中国医药工业杂志；２００３，３４（７）；３３０３３２． |
